FISH/ISH (fluorescenční in situ hybridizace)

Co je toto vyšetření

Zkratka FISH zní trochu záhadně, ale za ní se skrývá jeden z nejpřesnějších způsobů, jak nahlédnout přímo do DNA buněk a odhalit změny, které by jinak zůstaly skryté. Fluorescenční in situ hybridizace — to je metoda, při níž laboratoř použije speciálně označené molekuly (říká se jim sondy), které se přichytí přesně na tu část chromosomu, o které chce lékař vědět víc. Tyto sondy svítí ve fluorescenčním mikroskopu jako malá světýlka — proto to slovo „fluorescenční". Výsledkem je obraz, kde lékař vidí, zda je daný gen nebo chromosomální úsek přítomný ve správném množství, zda chybí, nebo zda je ho naopak příliš mnoho. Právě to může být klíčové rozhodnutí pro volbu správné léčby — proto je FISH tak cenné vyšetření v onkologii i genetice.

Proč se dělá

• Rakovina prsu — zjišťuje se, zda nádor obsahuje nadměrné množství genu HER2 (gen, který způsobuje rychlý růst nádoru), což rozhoduje o tom, zda pacientka může být léčena cílenou biologickou léčbou.
• Karcinom plic — hledají se přestavby genů ALK a ROS1, protože jejich přítomnost umožňuje použít moderní cílené léky místo klasické chemoterapie.
• Chronická myeloidní leukémie — potvrzuje nebo vylučuje přítomnost tzv. Philadelphia chromosomu (typická chromosomální porucha spojená s tímto typem leukémie).
• Lymfomy a jiné krevní nádory — odhaluje specifické chromosomální přestavby, které pomáhají zařadit typ nádoru a zvolit léčbu.
• Prenatální diagnostika — rychlé zjištění, zda plod nemá nadpočetný chromosom, například u Downova syndromu (trisomie 21) nebo jiných chromosomálních vad.
• Sledování léčby — po zahájení terapie se kontroluje, zda počet postižených buněk klesá, tedy zda léčba zabírá.

Jak se připravit

• FISH není klasické vyšetření krve, při kterém přijdete a odejdete — laboratoř pracuje s materiálem, který byl odebrán při jiném výkonu (biopsie, operace, odběr kostní dřeně nebo plodové vody). Vy se tedy připravujete na ten primární výkon, ne přímo na FISH.
• Před biopsií nebo odběrem kostní dřeně vás lékař informuje o konkrétních pokynech — nejčastěji se jedná o lačnění a vysazení léků na ředění krve. Vždy se řiďte instrukcemi svého lékaře.
• Na samotné zpracování vzorku v laboratoři není třeba se nijak speciálně připravovat — laboratoř pracuje bez vaší přítomnosti.
• Připravte se spíše psychicky na to, že výsledky nepřijdou hned — FISH je složitá laboratorní metoda, která trvá delší dobu.

Jak probíhá

Z vašeho pohledu jako pacienta se FISH „neděje" — vy jste v té chvíli doma. Celý proces probíhá v laboratoři na vzorku tkáně nebo buněk, který byl odebrán dříve. Laboratorní odborník vzorek zpracuje, přidá k buňkám fluorescenčně označené sondy a nechá je v přesně kontrolovaných podmínkách přichytit na správná místa chromosomů. Poté vzorek prohlédne pod speciálním mikroskopem, kde sondy svítí jako barevné tečky — a právě podle počtu a polohy těchto teček se hodnotí výsledek. Celý laboratorní proces trvá obvykle dva až pět pracovních dní, v některých případech i déle. Výsledek dostanete písemně a lékař vám ho vysvětlí na kontrolní návštěvě.

Co znamenají výsledky

Výsledek FISH se vyjadřuje jako počet signálů (světelných teček) v buňce nebo jako poměr mezi dvěma hodnotami. Normální buňka má každý gen ve dvou kopiích — jedna od matky, jedna od otce. Pokud tedy laborant vidí u každé buňky dvě tečky příslušné barvy a nic navíc, je výsledek negativní, tedy bez patologické změny. Pokud se tečky množí — například u HER2 genu jsou jich více než čtyři na jednu buňku — hovoří se o amplifikaci (zmnožení genu), což je patologický nález. Chybějící tečka naopak znamená deleci (ztrátu části chromosomu). Výsledky interpretuje vždy lékař ve spojení s ostatními nálezy — výsledek FISH sám o sobě nedává diagnózu, ale je důležitou součástí celkového obrazu onemocnění a volby léčby.

Časté otázky o FISH/ISH (fluorescenční in situ hybridizace)